

纳米压痕技术是评估生物材料(如软骨)微观力学性能的重要手段,但样品脱水会显著改变其力学行为(如模量虚高、蠕变特性失真)。为确保数据可靠性,保湿需贯穿实验全流程:
1.前处理阶段
-浸泡平衡:离体样品需在生理盐水或PBS中浸泡≥2小时,确保内部水分平衡。软骨等亲水性组织需避免暴露于空气,操作全程用润湿纱布覆盖。
-切割保护:若需切割样品,应在液体环境中进行(如培养皿内注入缓冲液),或使用水雾喷淋工具减少创面蒸发。
2.测试环境控制
-湿度腔室:优先选用配备环境腔室的纳米压痕仪,维持相对湿度≥95%(接近生理条件)。若无专用腔室,可搭建临时湿盒(如培养皿+湿海绵)。
-液体覆盖:对非导电样品,可滴加少量缓冲液覆盖测试区域,但需避免液面波动影响压痕定位(液膜厚度<100μm为宜)。
3.操作技巧
-快速转移:样品从储存液移至测试台的时间≤30秒,转移时用吸满缓冲液的滤纸衬底。
-间歇补水:长时测试(>15分钟)时,用微量移液器在样品非测试区补液,利用毛细作用保湿,避免直接冲刷压痕点。
-温度协同:环境温度控制在4-25°C(依实验设计),高温加速蒸发,需额外增加湿度补偿。
4.验证与监控
-重量法校准:实验前取同批样品测定脱水率(如暴露5分钟失重>3%则需优化流程)。
-形貌监测:压痕前后用光学显微镜观察表面皱缩或裂纹,出现即表明脱水失效。
>注意:过度保湿可能导致样品膨胀或液体干扰压电传感器。需平衡两点:缓冲液添加量以维持表面光泽但不形成水滴为佳;导电样品需改用绝缘保湿层(如琼脂糖凝胶膜)。
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