科普：临床诊断液质联用检测的尿样稀释倍数如何确定？

在临床诊断中，液质联用（LC-MS/MS）检测尿样时，确定稀释倍数是一项关键步骤，目的是确保目标分析物的浓度落在仪器的最佳检测范围内（即线性范围内），从而获得准确、可靠的结果。广州中森检测等专业机构会根据具体检测项目和待测物的特性，综合以下因素科学确定稀释倍数：

1. 目标分析物的预期生理/病理浓度范围：

* 这是最重要的依据。不同物质在尿液中的浓度差异巨大。例如：

* 内源性物质（如激素、代谢物）： 浓度范围相对稳定（但个体间仍有差异），实验室会基于大量人群数据建立参考区间。

* 外源性物质（如治疗药物、滥用药物、毒素）： 浓度范围非常宽泛，取决于剂量、摄入时间、个体代谢差异等。治疗药物监测（TDM）通常有目标治疗浓度范围，而滥用药物或毒素浓度可能极高。

* 实验室需要了解待测物在目标人群（如健康人、特定疾病患者、用药患者）中可能出现的最高和最低浓度。

2. 分析方法的动态范围和线性范围：

* 动态范围： 仪器能检测到的最低浓度（定量限，LOQ）到最高浓度（通常指响应仍与浓度成比例的上限）之间的范围。

* 线性范围： 在动态范围内，仪器响应信号与样品浓度严格呈线性关系的范围。这是进行准确定量分析的最佳区间。

* 实验室在方法开发验证时，会精确测定该方法的线性范围（例如：0.5 ng/mL - 500 ng/mL）。目标分析物的浓度必须落在这个线性范围内才能保证结果准确。

3. 基质效应：

* 尿液成分复杂（盐分、尿素、代谢物等），可能干扰目标物的离子化效率（离子抑制或增强效应）。稀释是降低基质效应的常用手段。但过度稀释可能使低浓度样品低于LOQ。因此，稀释倍数的选择需在确保浓度在线性范围内和有效控制基质效应之间取得平衡。

4. 仪器灵敏度（LOQ）：

* 如果目标物的预期最低浓度接近或低于方法的LOQ，则不能过度稀释，否则会导致假阴性或结果不准确。

广州中森检测的浓度范围适配策略：

广州中森检测等专业实验室会采取以下策略来适配浓度范围并确定稀释倍数：

1. 基于文献和经验设定初始稀释倍数： 根据目标分析物的已知特性、常见浓度范围以及已验证方法的线性范围，设定一个初始的、较常用的稀释倍数（如1:10, 1:20, 1:50, 1:100等）。这适用于浓度范围相对稳定或可预测的项目。

2. 结果反馈与调整：

* 如果检测结果（尤其是高浓度样品）接近或超出线性范围上限（表现为响应值饱和或曲线平台），则提示初始稀释倍数不足，需要增加稀释倍数重新检测。

* 如果检测结果接近LOQ或低于LOQ，则提示初始稀释倍数过大，需要减小稀释倍数或用原液直接进样重新检测（如果基质效应允许）。

3. 预设稀释方案： 对于某些浓度范围特别宽泛的项目（如某些药物滥用筛查），实验室可能预先设定不同梯度的稀释方案（如原液、1:10、1:100）。如果低倍稀释结果超出上限，则自动采用高倍稀释方案重新检测。

4. 仪器自动稀释功能： 现代LC-MS/MS仪器常配备自动稀释功能（在线稀释），能根据初步扫描信号判断样品浓度是否过高，并自动进行适当稀释后重新进样分析，提高效率。

5. 方法学验证与持续优化： 实验室在建立和验证方法时，会系统评估不同稀释倍数下的线性范围、精密度、准确度和基质效应，确定最优的稀释策略。并会根据实际运行数据和客户反馈持续优化。

总结：

尿样LC-MS/MS检测的稀释倍数，核心目标是将目标分析物的浓度调整至仪器分析方法的最佳线性范围内。广州中森检测等实验室通过结合目标物的预期浓度范围、方法的已验证线性范围和灵敏度、基质效应影响以及实际检测结果的反馈，科学、动态地确定或调整稀释倍数。对于浓度范围差异大的项目，预设多级稀释方案或利用仪器自动稀释功能是常见且高效的适配策略。最终目的是确保为临床诊断提供准确可靠的定量结果。