样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;
注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,外泌体NTA检测,样本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。
外泌体装载着各种免1疫相关分子,通过这些分子来调节免1疫应答。例如,在细胞杀伤性T细胞或者自然杀伤性细胞来源的外泌体上,携带Fas配体、TRAIL、CD40配体等TNF家族蛋白,可诱导靶1细胞凋亡。
有报道称,癌细胞中也可以释放装载着Fas配体或TRAIL等的外泌体,诱导免1疫细胞凋亡,使癌细胞免受免1疫细胞的攻击。一般情况下,TNF家族蛋白以膜结合形式产生,被膜型金属蛋白酶切割后转变为可溶性蛋白。膜结合蛋白主要担负诱导细胞凋亡的功能,但可溶性蛋白的活性较弱。
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