科锐诺生物科技(多图)-冷杉木质部切片
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武汉科锐诺生物科技有限公司
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(王经理 先生)
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常见的生物切片一般有三种,徒手切片、石蜡切片、火棉胶切片三种。徒手切片法简单省时间,容易掌握,虽有局限性,石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。

HE染色是制作切片过程中较为常用的染色方法之一,细胞核被苏染成鲜明的蓝色,基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。

贴片:切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理,但是切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。首先将连串的切片投入到44℃左右(视蜡的熔点而定,此温度适合熔点为59℃左右的石蜡)的温水浴中,冷杉木质部切片,这时切片都浮在水面上,由于表面张力的作用使切片自然展平,用镊子将切片分开,然后用防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于60℃ 烤箱烤片2个小时即可。

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