为什么要提供GFP空载的对照图片?
(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。
(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。
拍摄时为什么有明场通道?
(1)显示细胞状态,有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态,变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。
(2)显示荧光确实是细胞内蛋白表达的,而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。
蛋白质亚细胞定位的研究方法
1、融合报告基因定位法
将绿色荧光蛋白(GFP)及其衍生蛋白、β-葡萄糖苷酸酶(GUS)等报告基因,与目标蛋白基因融合在一起,由目标蛋白的引导信号进行亚细胞定位,对报告蛋白的光信号进行跟踪和观察,从而确定目标蛋白的定位。该方法是目前使用广泛的蛋白质亚细胞定位研究方法。
2、荧光标记定位法
将反应与化学光学信号相结合,通过特异性的荧光标记与目标蛋白(抗原)结合,通过荧光信号检测,确定目标蛋白的亚细胞位置。目前标记信号不局限于荧光素,还有同位素、酶、胶体金颗粒、纳米金属颗粒等。
为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?
不同的预测网站有不同的计算方法,BIFC,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。
适用于什么实验场景?
(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。
(2)研究蛋白相互作用,与酵母双杂实验结果相互验证。
湖北BIFC-贝科新肽科技公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司,公司位于:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,多年来,贝科新肽坚持为客户提供好的服务,联系人:夏总。欢迎广大新老客户来电,来函,亲临指导,洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴!温馨提示:以上是关于湖北BIFC-贝科新肽科技公司的详细介绍,产品由武汉贝科新肽科技有限公司为您提供,如果您对武汉贝科新肽科技有限公司产品信息感兴趣可以联系供应商或者让供应商主动联系您 ,您也可以查看更多与化学试剂相关的产品!
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