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将上述复合物直接加入到细胞培养基中,轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。在极0少情况下会出现贴壁细胞脱落现象,可先从待转染细胞孔中吸取 500μl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染,直接加入到无细胞贴壁的对面或侧面并摇匀即可。
使用方法:
1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。备注:如果筛选抗药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染试剂的zui适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。
已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8);如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 1989 Jan 25;264(3):1508-15);转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小,脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。 超快型转染试剂-博特龙技术有限公司(图)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司为客户提供“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”等业务,公司拥有“博奥龙/Biodragon AbBox”等品牌,专注于生物制品等行业。,在江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:刘总。温馨提示:以上是关于超快型转染试剂-博特龙技术有限公司(图)的详细介绍,产品由苏州博特龙免疫技术有限公司为您提供,如果您对苏州博特龙免疫技术有限公司产品信息感兴趣可以联系供应商或者让供应商主动联系您 ,您也可以查看更多与生物制品相关的产品!
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