蛋白质可通过多种方式共价交联到微球表面。微球表面含有环氧基、氯、醛基、羧基等基团,都可以和的Fc端的氨基反应,形成共价键。当选择共价交联方式的时候,往往需要考虑交联的效期、工艺复杂程度和后的带电状况。
种基团可以直接与蛋白的氨基反应,形成共价键,龙岩纳米微球,使用起来较方便,但储存稳定性较之羧基微球稍差。而羧基微球则需经过EDC/NHS活化之后,才与蛋白的氨基反应,形成共价键。由于羧基微球本身不具有直接和蛋白质反应的性能,因此具有较强的化学稳定性。两种方法各有优缺,在选择的时候,纳米磁性微球,需根据本身的情况进行选择。
核酸纯化用磁性微球产品质量参差不齐,要如何选择合适的磁性微球?以下是核酸纯化磁性微球选择金标准,仅供参考:
1. 粒径均一;
2. 尺寸合适:根据样本选择尺寸合适的微球;
3. 适当的密度:良好的悬浮性,更适应高通量自动提取,并增加实验的稳定性和均一性;
4. 基础材料的组成(亲水或疏水);
5. 表面化学特征(反应基团和数量):有丰富的表面活性基团,可和生化物质偶联,并在外磁场的作用下实现与被待测样品的分离;
6. 表面物理特征(比表面积和孔径):一般来说粒径越小,纳米微球材料,比表面积越大,但比表面积并不全由粒径大小决定,也并不是比表面积越大吸附效果就越好;
7. 厂家的批量生产能力:单批次产能高,确保产品性质稳定;
8. 磁珠的非特异性吸附低;
9. 磁响应时间:磁响应时间影响固液分离效率;
10. 超顺磁性(优异的再分散能力):外磁场作用下超顺磁性材料磁化率远高于一般顺磁性材料的磁化率。
乳胶微球(60nm-500nm)可应用于微粒增强浊度法,以多为基础的改良比浊分析法,利用基因工程方法将与乳胶微粒结合,当抗原相结合时便形成了抗原--乳胶微粒复合物,增强了反应吸光度,反应液在一定波长处比浊,与同样处理的标准液比较,聚苯乙烯纳米微球,计算标本中抗原的含量。利用生化分析仪进行比浊测定,整个分析过程只需几分钟,该方法与传统比浊法比较其灵敏度更高,可达ng/ml或pg/ml。
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