生物样品检测用 LCMS-MS 服务:样品保存要点
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  • 生物样品 LC-MS/MS 检测:不容忽视的样品保存黄金法则

    生物样品的稳定性是LC-MS/MS检测成功的基石。忽视保存要点,可能导致目标物降解、转化或基质效应加剧,直接影响数据的准确性与可靠性。以下关键环节务必严格把控:

    1. 温度控制:生命活动的“暂停键”

    * 立即处理与预冷: 采集后(尤其是血液、组织),立即置于冰上(4℃)或预冷的离心管/保存管中,最大限度抑制酶活性与化学降解。

    * 速冻是关键: 需长期保存(>24-48小时)的样品(血浆/血清、组织匀浆、细胞裂解液、尿液等),必须快速冷冻。推荐使用液氮或干冰,避免冰晶缓慢形成破坏细胞结构或目标物(如蛋白质、多肽、不稳定的代谢物)。-80℃超低温冰箱是长期保存的金标准。

    * 避免反复冻融: 冻融循环是样品稳定性的大敌! 每次冻融都可能导致目标物降解、蛋白质聚集或沉淀。务必分装保存! 将样品预先分装成单次检测用量的小份,仅在使用时取出所需分量。标记清晰,避免混淆。

    2. 防腐与稳定剂:抵御降解的“盾牌”

    * 血液样品: 根据目标物性质选择合适的抗凝剂(EDTA、肝素、柠檬酸钠)。某些检测需特定添加剂(如NaF抑制糖酵解酶保血糖稳定;蛋白酶抑制剂混合物保护多肽/蛋白质)。

    * 其他样品: 尿液、组织匀浆等也需考虑添加稳定剂(如酸、碱、抗氧化剂、螯合剂),具体需参照分析方法或文献。添加任何稳定剂前,务必确认其不影响后续LC-MS/MS分析(如不引入干扰峰、不抑制离子化)。

    3. 避光与惰性环境:减少“意外”反应

    * 避光: 对光敏感的目标物(如某些维生素、胆红素、光敏药物及其代谢物),保存和操作全程需使用棕色避光管或在暗处进行。

    * 惰性气体保护(可选): 对氧极度敏感的样品(如某些多不饱和脂肪酸、还原性物质),可在样品上方充入氮气或氩气以置换空气,减少氧化反应。

    4. 容器选择与清洁:避免“额外贡献”

    * 材质: 首选聚丙烯(PP)材质管。避免使用普通玻璃(易吸附、可能溶出离子)或含增塑剂的塑料管(如某些PVC管)。特殊检测(如痕量金属分析)需使用超洁净管。

    * 清洁度: 确保容器无污染、无残留。新管也可能含添加剂,必要时清洗。避免使用含洗涤剂残留的容器,其可能严重干扰质谱信号。

    5. 记录与监控:可追溯的“生命线”

    * 清晰标记: 样品信息(ID、类型、采集日期时间、保存条件、添加物、分装次数、冻融次数)必须清晰、牢固标记。

    * 温度监控: 冰箱/冰柜需配备持续温度记录仪并定期校准,确保实际温度符合要求(-80℃冰箱实际温度应在-70℃至-80℃间)。液氮罐需定期补充液氮。

    * 冻融记录: 严格记录每次取用(冻融)的时间和操作人。

    总结: 生物样品的保存绝非简单的“放进冰箱”。它是贯穿从采样到上机前整个流程的精密管理,核心目标是维持目标分析物的原始状态与浓度。严格遵守温度控制、合理使用稳定剂、避免物理化学应激(光、氧、冻融)、选择合适容器并做好详实记录,是确保您的LC-MS/MS检测结果准确、可靠、可重现的黄金法则。忽视任何一个环节,都可能让宝贵的样品和后续分析工作功亏一篑。

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