

科普:糖类液相检测的氨基柱适用性及单糖与寡糖区别
一、氨基柱在糖类液相检测中的适用糖类
在高效液相色谱(HPLC)分析中,氨基柱(通常指键合了氨基官能团-NH2的硅胶色谱柱)是分离分析糖类物质(尤其是单糖、双糖和低聚寡糖)的常用选择之一。其原理主要基于糖分子上的多个羟基(-OH)与固定相上的氨基(-NH2)之间形成的氢键相互作用,以及可能的偶极-偶极作用,属于亲水作用色谱(HILIC)的一种形式。
氨基柱特别适用的糖类包括:
1.单糖:这是最小的糖单元,无法再水解。例如:
*戊糖:木糖(Xylose)、阿拉伯糖(Arabinose)、核糖(Ribose)
*己糖:葡萄糖(Glucose)、果糖(Fructose)、半乳糖(Galactose)、甘露糖(Mannose)
*脱氧糖:鼠李糖(Rhamnose)、岩藻糖(Fucose)
2.双糖:由两个单糖分子脱水缩合而成。例如:
*蔗糖(Sucrose,葡萄糖+果糖)
*麦芽糖(Maltose,葡萄糖+葡萄糖)
*乳糖(Lactose,葡萄糖+半乳糖)
*纤维二糖(Cellobiose,葡萄糖+葡萄糖)
3.低聚寡糖(通常指3-10个单糖聚合):由少量(通常3-10个)单糖分子通过糖苷键连接而成。例如:
*棉子糖(Raffinose,三糖:半乳糖-葡萄糖-果糖)
*水苏糖(Stachyose,四糖:半乳糖-半乳糖-葡萄糖-果糖)
*低聚果糖(Fructo-oligosaccharides,FOS)
*低聚半乳糖(Galacto-oligosaccharides,GOS)
*低聚异麦芽糖(Isomalto-oligosaccharides,IMO)
4.糖醇:单糖的羰基被还原成羟基的产物。例如:
*山梨醇(Sorbitol)、甘露醇(Mannitol)、木糖醇(Xylitol)
5.氨基糖:如葡萄糖胺(Glucosamine)、半乳糖胺(Galactosamine)等(需注意氨基柱本身的氨基可能带来干扰或特殊保留行为)。
注意事项:
*不适用:高分子量的多糖(如淀粉、纤维素、果胶)通常不适合直接在氨基柱上分析,因其分子量大、保留过强、易堵塞柱子,常需酶解成单糖/寡糖后再分析,或使用其他色谱模式(如凝胶渗透色谱GPC/SEC)。
*柱寿命:氨基柱对还原糖(如葡萄糖、麦芽糖、乳糖)比较敏感,因其醛基可能与固定相氨基发生席夫碱反应,导致柱效下降或保留时间漂移。使用较低柱温、避免强酸性流动相(pH<2会质子化氨基,改变保留机制)以及定期冲洗维护可延长柱寿命。
*流动相:通常使用高比例(70-85%)的乙腈(ACN)与水或缓冲盐(如磷酸盐、乙酸铵)的混合液作为流动相。
二、单糖与寡糖的区别(以广州中森检测等机构视角)
作为提供检测服务的机构(如广州中森检测),在分析糖类成分时,清晰理解单糖和寡糖的区别至关重要:
1.化学结构基础:
*单糖:是糖类物质的最小、最基本的结构单元。它们是不能被水解成更小糖分子的简单糖。化学通式通常为(CH2O)n(n=3-7)。具有醛基(醛糖)或酮基(酮糖)。例如葡萄糖(C6H12O6)、果糖(C6H12O6)。
*寡糖:又称低聚糖。是由2个到约10个(通常定义)单糖分子通过糖苷键脱水缩合连接而成的短链糖聚合物。根据单糖数量,可细分为双糖(2个)、三糖(3个)、四糖(4个)等。
2.物理化学性质:
*单糖:多为结晶性固体,易溶于水,有甜味(程度不同)。大部分具有还原性(游离醛基或酮基)。
*寡糖:一般也是可溶于水的晶体或粉末,甜度通常低于单糖(蔗糖例外)。寡糖的还原性取决于其结构末端是否有游离的半缩醛羟基。例如,蔗糖(非还原糖)无游离醛基或酮基,麦芽糖(还原糖)则有。
3.功能与来源:
*单糖:是生物体能量的直接来源(如葡萄糖是血糖的主要成分),也是构成寡糖和多糖的“积木”。广泛存在于水果、蜂蜜等天然食物中。
*寡糖:功能多样:
*提供能量(如蔗糖、麦芽糖)。
*许多寡糖(如低聚果糖FOS、低聚半乳糖GOS)是重要的益生元,不能被人体消化酶分解,但能被肠道有益菌(如双歧杆菌、乳酸杆菌)发酵利用,促进其生长繁殖,调节肠道微生态平衡。
*存在于豆类、某些蔬菜(如洋葱、大蒜)、母乳等中,或作为功能性食品添加剂。
4.检测分析要点(以HPLC为例):
*单糖分析:通常可以直接进样分析,目标明确为单个单糖分子。
*寡糖分析:目标物是特定的糖链结构(如蔗糖、棉子糖、特定的FOS等)。需要根据其聚合度、单糖组成和连接方式(α/β键,1-2/1-4/1-6连接等)进行分离和鉴定。有时需要特定的酶解步骤来确认结构或区分同分异构体。
*总糖/多糖分析:常需先将样品中的多糖(如淀粉、纤维素)通过酸水解或酶水解彻底分解成单糖,再测定总单糖含量来推算总糖或特定多糖含量。寡糖在此过程中也可能被水解成单糖。
总结:氨基柱是分析单糖、双糖及低聚寡糖的有效工具。单糖是糖的基石,寡糖则是由少数单糖构建的短链聚合物,两者在结构、性质、功能及检测方法上均有显著区别。像广州中森检测这样的专业机构,正是利用这些科学原理和先进的分析手段(如配备氨基柱的HPLC),精确地测定食品、药品、保健品等样品中不同类型糖分的含量和组成。
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