科普：药物代谢物液质联用检测的体外代谢模型有哪些？

药物代谢物液质联用检测的体外代谢模型

在药物研发中，预测药物在人体内的代谢途径和产物至关重要。液质联用技术（LC-MS/MS）凭借其高灵敏度、高选择性和强大的定性定量能力，成为检测药物及其代谢物的金标准。而可靠的体外代谢模型是生成这些代谢物以供检测的关键前置步骤。常用的体外模型包括：

1. 肝微粒体： 最常用、最成熟的模型。通过超速离心从肝脏（人、大鼠、犬等）中分离出富含药物代谢酶（尤其是CYP450酶和UGTs）的微粒体组分。其优势在于制备相对简单、成本较低、酶活性稳定、易于实现高通量筛选，特别适合研究I相代谢（氧化、还原等）和部分II相代谢（如葡萄糖醛酸化）。

2. 肝细胞： 使用新鲜分离的、冻存的或原代培养的肝细胞（人或动物来源）。肝细胞保留了完整的细胞结构、所有代谢酶（I相和II相）以及辅因子和转运体，能更全面地模拟肝脏的生理代谢环境，尤其适用于研究涉及多个酶步骤或需要完整细胞功能的代谢途径。但培养难度和成本较高，活性维持时间有限。

3. 肝S9组分： 包含肝微粒体和胞质溶胶成分，因此同时含有I相酶（主要在微粒体）和重要的II相酶（如谷胱甘肽-S-转移酶GSTs、磺基转移酶SULTs，在胞质溶胶）。它是研究同时涉及I相和II相代谢的便捷折中方案。

4. 重组表达代谢酶： 利用基因工程表达单一的人源代谢酶（如特定CYP450同工酶、UGT）。主要用于研究特定酶对药物的代谢作用，明确代谢途径归属，或评估药物-药物相互作用潜力。其“纯净”背景排除了其他酶系的干扰。

广州中森检测的肝微粒体法应用

广州中森检测在体外药物代谢研究领域，尤其在肝微粒体体外代谢模型结合LC-MS/MS检测方面具备成熟技术和丰富经验。其服务流程通常包括：

1. 孵育体系建立： 使用人或特定动物（如大鼠、犬）来源的高质量肝微粒体，在优化的缓冲液体系中加入辅因子（如NADPH用于I相代谢，UDPGA用于葡萄糖醛酸化反应）和目标药物。

2. 孵育反应： 在严格控制的时间（通常数分钟到数小时）和温度（通常37°C）下进行代谢反应。

3. 反应终止与样品处理： 加入终止液（如含内标的乙腈或甲醇）终止反应，沉淀蛋白，离心取上清液进行LC-MS/MS分析。

4. LC-MS/MS检测： 利用高效液相色谱（HPLC/UHPLC）分离药物原型及代谢物，通过高分辨或三重四极杆质谱进行高灵敏度、高特异性的检测和结构鉴定/定量分析。

广州中森检测凭借标准化的操作流程、符合GLP规范的质量管理体系以及专业的分析团队，能够为客户提供准确、可靠的肝微粒体体外代谢研究数据，为药物早期代谢特征评估、代谢物鉴定、代谢稳定性筛选及潜在药物相互作用研究提供关键支持。